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凍存方法:準備所需凍存細胞,貼壁細胞按以下步驟進行消化重懸:1、將培養(yǎng)皿中的原培養(yǎng)基棄之,用 PBS 清洗細胞
2、將 PBS 棄之,加 Trypsin/EDTA-PBS 室溫孵育5 分鐘
加入新的含血清培養(yǎng)基,用移液器輕輕吹打懸浮細胞;如果凍存細胞為懸浮細胞,以上步驟可忽略,直接進行步驟4:3.將細胞懸液或者懸浮細胞液轉(zhuǎn)移至離心管,進行細胞計數(shù);
細胞懸液 200-300g 離心5分鐘,上清液棄之:
加入預(yù)冷好的 LaboBanker2 凍存液重懸細胞至密度為 5x105個/ml至 5x106個/ml;
將細胞懸液分裝入凍存管,每管體積為 0.5ml至 1ml;
將細胞置于 2-8°℃5 分鐘:G
將細胞轉(zhuǎn)移至-80℃保存。如需長期保存,-80℃C過夜將細胞后轉(zhuǎn)移至液氨中。
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